熒光原位雜交(FISH)的原理是什么？

2017-02-15瀏覽量：1958編輯：來源：

熒光原位雜交(FISH)是一種細胞遺傳學(xué)技術(shù)，可以用來對核酸進行檢測和定位。熒光標(biāo)記的核酸探針只和具有高度相似性的核酸雜交，可用于染色體上基因的定位，或在分子生態(tài)學(xué)中用來標(biāo)記不同分類細菌或古菌中的核糖體RNA。
FISH(fluorescence in situ hybridization)技術(shù)是一種重要的非放射性原位雜交技術(shù)。它的基本原理是:如果被檢測的染色體或DNA纖維切片上的靶DNA與所用的核酸探針是同源互補的，二者經(jīng)變性-退火-復(fù)性，即可形成靶DNA與核酸探針的雜交體。將核酸探針的某一種核苷酸標(biāo)記上報告分子如生物素、地高辛，可利用該報告分子與熒光素標(biāo)記的特異親和素之間的免疫化學(xué)反應(yīng)，經(jīng)熒光檢測體系在鏡下對待測DNA進行定性、定量或相對定位分析。
應(yīng)用：
用于染色體數(shù)目檢查，還可用于部位精細改變的檢查。用來發(fā)現(xiàn)新生兒染色體異常疾病如21三體Down氏綜合片)18三體(Edward綜合征)，13體(Patau 綜合征)，45、XO(turner氏綜合征)和47XXY(Klinfelter綜合征)。
白血病的診斷方面，該技術(shù)極易發(fā)現(xiàn)殘存的白血病細胞，特別適合化療后白血病患者。
實體腫瘤方面，應(yīng)用較為廣泛的是乳腺癌臨床診斷，為單克隆抗體Herceptin的用藥給予指導(dǎo)，此外還適用于卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌、涎腺腫瘤及胃癌等惡性腫瘤。

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